產品參數:
檢測儀器 | 紫外分光光度計 | 檢測波長 | 340 nm |
主要檢測設備及配套 | 紫外分光光度計/1 mL 石英比色皿(d=10 mm) | 信號響應 | 遞增型 |
預計測定時間 | 3h (50 Samples) | 需自備試劑 | 無 |
檢測方法 | NADH速率法 | 運輸條件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
檢測原理:
α-酮戊二酸脫氫酶催化α-酮戊二酸、NAD+和CoA生成琥珀酰CoA、CO2和NADH,NADH在340 nm具有特征吸收峰,通過吸光值變化即可測定NADH的生成速率,進而表征α-KGDH的活性。
產品標準注意事項:
①測定過程中所有試劑和待測樣本均需在冰上放置,以免變性和失活;
②比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃,可以取燒杯裝入一定量37℃或25℃的蒸餾水,將燒杯放入37℃或25℃恒溫水浴中,在反應過程中將比色皿連同反應液放在此燒杯中;
③準確在0 s和120 s處完成讀數,以保證實驗結果的準確性;
④?A測定應在0.01-0.25之間,若?A測定大于0.25,需將樣本進行稀釋后再進行測定;
⑤提取液中含有一定濃度的蛋白(約1 mg/mL),測定樣品蛋白濃度時需減去提取液的蛋白含量;